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熒光分光光度計操作規程

更新時間：2018-01-26 點擊次數：17032

1. 開機

a. 確認所測試樣液體或固體，選擇相應的附件。

b. 先開啟儀器主機電源，預熱半小時后啟動電腦程序RF-530XPC，儀器自檢通過后，即可正常使用。

2. 測樣

(1) spectrum模式

a. 在“Acquire Mode”中選擇“Spectrum”模式。

· 對于做熒光光譜的樣品，“Configure”中“Parameters”的參數設置如下：

“Spectrum Type”中選擇Emission;給定EX波長;給定EM的掃描范圍(zui大范圍220nm—900nm);設定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度，點擊“OK”完成參數的設定。

· 對于做激發光譜的樣品，“Configure”中“Parameters”的參數設置如下：

“Spectrum Type”中選擇Excitation;給定EM波長;給定EX的掃描范圍(zui大范圍220nm—900nm);設定掃描速度;掃描間隔;狹縫寬度，點擊“OK”，完成參數的設定。

b. 在樣品池中放入待測的溶液，點擊“Start”，即可開始掃描。

c. 掃描結束后，系統提示保存文件。可在“Presentation”中選擇“Graf” “Radar” “Both Axes Ctrl+R”來調整顯示結果范圍;在“Manipulate” 中選擇“Peak Pick”來標出峰位，zui后在“Channel”中進行通道設定。

d. 述操作步驟對固體樣品同樣適用。

(2) Quantitative模式

a. 在“Acquire Mode”中選擇“Quantitative”模式。

b. “Configure”中“Parameters”的參數設置如下：

Method 選擇“Multi Point Working Curve” ;“Order of Curve” 中選擇 “1st和“No” ;給定EX、EM波長;設定狹縫寬度，點擊“OK”，完成參數的設定。

c. 在樣品池中放入裝有空白溶液的比色皿后執行“Auto Zero” 命令校零點。

d. 點擊“Standard”模式，制作工作曲線。

e. 將樣品池中的空白溶液換成一系列的已知濃度的樣品標準溶液進行測量，執行“Read”命令，得到相應的熒光強度，系統根據測量值自動生成一條“熒光強度-濃度”曲線。

f. 在“Presentation” 中選擇“Display Equation”，得到標準方程。將此工作曲線 “Save”為擴展名為“.std”的文件。

g. 工作曲線制備完畢，即可進入未知樣的測量，選擇進入“Unknown”模式，將樣品池中的已知濃度標準溶液換成待測樣品溶液，執行“Read”命令，即可得到相應的熒光強度和相應的濃度。將此 “Save”為擴展名為“.qnt”的文件。

(3) Time Course模式

a. 在“Acquire Mode”中選擇“Time Course”模式。

b. “Configure”中“Parameters”的參數設置如下：

給定EX、EM波長;設定狹縫寬度;設定反應時間;讀取速度;讀取點數;

點擊“OK”，完成參數的設定。

c. 在樣品池中放入裝有空白溶液的比色皿后執行“Auto Zero” 命令校零點。

d. 將樣品池中的空白溶液換成待測溶液，點擊“Start”，即可開始掃描。掃描結束后，即可得到熒光強度對時間的工作曲線。

e. 將此工作曲線“Save”為擴展名為“.TMC”的文件。

3. 關機

退出軟件后關畢主機。