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可見分光光度計問題探討
更新時間:2018-11-06 點擊次數:2229

隨著科學技術的發展和精密儀器制造的進步, 分光 光度計的性能也在不斷優化與完善。 分光光度計是將成 分復雜的光分解為光譜線的儀器, 其測量范圍包括波長 在 200~380 nm 的紫外光區以及波長在 380~780 nm 的可 見光區。 可見分光光度計具有靈敏度高、 適用范圍廣、 準確度高、 結構緊湊、 價格低、 操作簡便、 取樣少以及 抗干擾性能*的優勢, 因此得到了十分廣泛的應用。 通過應用分光光度計, 可對樣品進行定性分析、 定量分 析。 定量分析即測定某溶液中某物質的濃度, 定性分析 即根據測定的某物質在不同波長的吸收光的峰值對該物 質進行定性。 不同光源均有自身*的發射光譜, 所 以, 可以應用不同發光體作為分光光度計的光源, 其 中, 鎢燈所發波長范圍在 380~780 nm 的光, 經過三棱 鏡折射之后, 能夠得到由紅橙黃綠藍靛紫構成的連續光 譜, 可以作為可見分光光度計的光源。

1 可見分光光度計的發展趨勢 可見分光光度計是一種精密的光譜化學分析設備, 具有精度高、 檢測限低、 價格低等特點, 可進行定量測 量、 動力學測試、 OD 值直接測量、 光譜掃描、 多波長 測試以及食品安全檢測、 總磷總氮檢測、 重金屬檢測、 DNA-蛋白質檢測、 農藥殘留檢測等 [1]。 因此, 可見分 光光度計在日用化工、 食品制造、 飲料制造等領域得到 了廣泛應用。 由此可見, 可見分光光度計有著良好的應 用前景, 市場需求較大。 目前, 較為常見的分光光度計主要包括紫光可見分 光光度計、 紅外分光光度計、 熒光分光光度計以及原子 吸收分光光度計。 從分光光度計的組件方面來看, 機刻 光柵正在迅速被全息光柵所取代; 從分光光度計的構型 方面來看, 微處理機控制的分光光度計逐漸取代手控單 光束、 雙光束自動記錄構型的分光光度計; 雙波長分光光度計、 快速掃描分光光度計等新興分光光度計正在迅 速發展。 在當今的信息社會化、 社會信息化時代背景 下, 實現可見分光光度計與計算機技術、 信息技術、 智 能技術等新興技術的有機結合, 提高可見分光光度計的 智能化水平、 自動化程度, 確??梢姺止夤舛扔嬆軌虮?持工作狀態, 預防人為操作誤差的出現, 從而可以 使可見分光光度計檢測結果的準確性、 可靠性得到顯著 提高。 現階段, 提高可見分光光度計的智能化水平、 自 動化程度, 是可見分光光度計的主要發展方向。 2 可見分光光度計的結構原理 2.1 可見分光光度計的工作原理 對于分光光度計, 其工作原理是, 在光的照射下, 溶液中的物質產生了對光的選擇性吸收效應。 不同的物 質, 其吸收光譜也有所不同, 所以, 在某單色光通過溶 液的時候, 其能量被吸收而減弱, 物質的濃度與光能量 的減弱程度之間存在一定的比例關系, 也就是朗伯比爾 定律: T=I/I0 A=KCL log (I0/I) =KCL 式中: T—— —透射比; I0—— —入射光強度; I—— —透射光強度; A—— —吸光度; K—— —吸收系數; C—— —溶液濃度; L—— —溶液光路長度 [2]。 由朗伯比爾定律可以看出, 在溶液光路長度 L、 吸 收系數 K 以及入射光強度 I0 保持不變的情況下, 溶液濃度 C 和透射光強度 I 成比例。

2.2 可見分光光度計的結構原理 在可見分光光度計的使用過程中, 被測溶液被某單 色光透過之后, 光電池接收該單色光, 并將其轉換為電 信號 PD, 經前置放大器放大。 360~800 nm 光譜區域內 的基準信號不同, 根據不同的基準信號, 單片機的微處 理器轉換器發出指令, 改變前置放大器的放大倍數, 至 基準信號達到單片機微處理器程序要求為止。 基準信號 進入模數轉換器, 轉換為數字信號, 傳送給單片機, 然 后進行數據處理。

3 可見分光光度計的誤差來源 波長準確度是可見分光光度計的主要計量指標, 其 指的是指示波長、 實際波長兩者之間的符合程度, 基于 此, 波長示值誤差對可見分光光度計的測量度有直 接影響。 雖然朗伯比爾定律是可見分光光度計的基本原 理與理論依據, 但只在應用單一波長的基礎上, 該定律 才成立。 在可見分光光度計的實際應用中, 若操作不當 或不夠注意, 便會受到雜散光的影響。 雜散光指的是投 射在光檢測儀器上不同于設定波長的光的總和。 雜散光 所帶來的誤差與其數量基本相同 [3], 即, 若可見分光光 度計的雜散光為 1%, 則其導致的誤差也為 1%左右。 產 生雜散光的原因一是光學元件受到水珠、 霉斑或者灰塵 的污染; 二是出現了漏光, 使得復合光混入; 三是光學 元件發生損壞或者是位置出現改變等。 基線平直度也是可見分光光度計的主要計量指標, 其指的是可見分光光度計的全波段, 每一波長點的光度 噪聲。 基線平直度、 漂移以及噪聲結合, 能夠反映可見 分光光度計的綜合性能。 其中, 漂移指的是可見分光光 度計在 500 nm 處與時間有關的光度變化量; 噪聲指的 是可見分光光度計在 250 nm、 500 nm 處的光度噪聲。 基線平直度超差, 有可能導致圖譜掃描變形或是出現偽 峰, 給可見分光光度計的測量結果帶來較大誤差。 4 可見分光光度計的日常維護及保養

(1) 應將可見分光光度計設備安裝在光源室, 并要 及時清潔密封窗、 反射鏡、 透鏡等光學元件, 不可用手 觸摸。 應避免光電轉換元件受潮積塵、 強光照射, 不可 長時間暴光 [4]。 定期更換干燥劑, 避免單色器盒的色散 元件受潮。 儀器使用完畢或者是暫停使用時, 用防塵套 罩住, 并放置防潮硅膠, 避免其受潮發霉。 對于反射 鏡、 透鏡上的灰塵, 應使用吹氣球吹除; 而手指印及其
他雜質, 則需用擦鏡紙擦拭; 污染嚴重時, 則需更換新 的反射鏡、 透鏡。

(2) 為了延長可見分光光度計光源的壽命, 在日常 使用該儀器的過程中, 應盡可能地減少開關儀器的次 數。 若光源亮度明顯減弱或者不穩定, 則需及時更換新 的光源。 光源關閉后, 不可立即重新開啟; 如果兩次測 量之間的時間間隔較短, 可以不關燈。

(3) 分光系統是可見分光光度計中主要的光學元 件, 對其潔凈度、 精度的要求*, 切忌將密封機罩隨 意打開; 必須打開時, 則需專業人員操作, 以避免分光 系統受損。

(4) 根據操作規范的要求, 正確使用吸收池, 對吸 收池的光學面進行仔細保護。 若是吸收池上遭受有色物 質的污染, 可使用 3 mol/L 的乙醇和 3 mol/L 的氯化氫混 合液進行洗滌。 切忌在電爐或火焰上對吸收池進行烘 烤、 加熱。

(5) 若是供電電源的電壓波動較大, 則需給可見分 光光度計配備穩壓器, 給予其有效的過壓保護; 對長期 不用的可見分光光度計, 應定期通電 20~30 min, 以確 保其正常使用。 (6) 定期根據 JJG 178—2007 等相關標準中的要 求, 檢定、 校準可見分光光度計, 確保其測量結果的可 靠性、 性。

5 結束語

可見分光光度計是一種集電子技術、 緊密機械及光 學科技為一體的理化分析儀器, 有著廣闊的發展空間。 可見分光光度計在實際應用中, 會受到波長準確度、 基 線平直度等方面誤差的影響, 為此, 應在日常使用過程 中加強對可見分光光度計的維護與保養, 確保可見分光 光度計的作用能夠得到充分發揮。


 

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